免疫接種后效果如何？能不能抵抗傳染�。窟@是我們十分關(guān)心的問題。免疫效果檢測的方法很多，諸如紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、玫瑰花環(huán)試驗(yàn)等。陜西正陽生物科技有限公司現(xiàn)將常用的而且一般單位可以進(jìn)行的紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)和瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)的原理介紹于后，供參考。

陜西正陽生物介紹免疫接種效果檢測方法

    1、紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（以新城疫抗體檢測為例）。原理新城疫病毒和其他一些病毒能與雞的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，當(dāng)有抗新城疫病毒抗體存在時，由于抗體于病毒 （抗原）發(fā)生中和，使病毒凝集紅細(xì)胞的作用發(fā)生抑制。抗體的量越多這種抑制作用越大。根據(jù)這一原理設(shè)計了新城疫抗體檢測的紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)。

    紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)有常量法和微量法，微量法是在96孔V型塑料反應(yīng)板上進(jìn)行，操作簡便，中等規(guī)模的雞場可以進(jìn)行。

    2、瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)（AGD）

    原理瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)，簡稱瓊擴(kuò)試驗(yàn)。是根據(jù)抗原和抗體能在含有電解質(zhì)的瓊脂凝膠中向周圍擴(kuò)散的，當(dāng)擴(kuò)散的抗原、抗體相遇時發(fā)生沉淀反應(yīng)，形成肉眼可見的沉淀線這一原理設(shè)計的。由于抗原抗體反應(yīng)是特異性的，因此，用瓊擴(kuò)試驗(yàn)可以檢測抗原，也可以檢測抗體，而且可以檢測抗原和抗體的效價。

    瓊擴(kuò)試驗(yàn)操作簡便、檢出率高，可用于多種雞病的檢測，如馬立克氏病、法氏囊病、傳染性喉氣管炎等。

    操作方法

    ① 瓊脂板的制備：按配方制備瓊脂凝膠。

    瓊脂條：1克

    氛化鈉：8克

    笨酚：少許

    蒸餾水：100毫克

    加熱至瓊脂完全溶化，四層紗布過濾，補(bǔ)充水分到100毫升。趁熱將瓊脂倒入平皿中，使厚度為3~4毫米，加蓋冷卻，凝固后置普通冰箱中備用，防凍結(jié)，可保存1周左右。

    ② 打孔：使用前取出平皿，進(jìn)行打孔，孔的分布如圖3，孔的直徑2~3毫米，孔與孔之間的距離應(yīng)是3毫米左右。孔內(nèi)的瓊脂塊可用牙簽或針頭挑出。打孔后把平皿底部在火焰上稍加熱，使瓊脂緊貼平皿底壁，防止樣品從平皿壁與瓊脂間流走。打孔器可以用鍋針制作，也可用易拉罐的鋁皮剪成適當(dāng)大小卷曲而成，直徑可以有多種，如2毫米、3毫米或再大一點(diǎn)，依需要而定。

    ③ 加樣：用微量加樣器或皮頭滴管吸取待檢血清加在周圍孔中，每孔可加一個樣品，中間孔加標(biāo)準(zhǔn)抗原，也可在周圍的任一個孔中加標(biāo)準(zhǔn)陽性血清作對照。樣品要加滿，但不要溢出。加樣后置20~30℃反應(yīng)，24、48、72小時進(jìn)行觀察。

    樣品多時需要進(jìn)行編號，樣品號應(yīng)與孔號一致，以免錯亂，瓊脂板上寫號時可用毛筆蘸碳索墨汁書寫，也可用記號筆在平皿底壁書寫。其他筆無法寫上。

    ④ 結(jié)果判定：陽性反應(yīng)者待檢血清孔與中央孔之間有灰白色沉淀線，無此線者為陰性。觀察時應(yīng)以日光燈為光源，對燈光調(diào)節(jié)平皿的角度可以很容易發(fā)現(xiàn)沉淀線。

    瓊脂試驗(yàn)可以定性也可定量。如要測法氏囊血清的杭體效價時，可以先把血清在96孔反應(yīng)板上進(jìn)行倍比稀釋，然后依次把稀釋后的血清加在周圍孔中進(jìn)行試驗(yàn)。蛋黃抗體效價也可用此法測定。